端粒酶活性检测论文 半定量测定端粒酶活性有什么意义？

半定量测定端粒酶活性有什么意义？

由于端粒酶活性在少数正常组织细胞中有微弱的表达，而且与细胞的增殖活跃程度、肿瘤的恶变程度及预后等有关，因此半定量测定端粒酶活性在临床应用上意义重大。 简便的方法是通过10倍稀释提取液以有无6bp差异的梯带产物为标准。

端粒酶的检测方法有哪些？

本文对其检测方法综述如下。 端粒酶在体外可以以其自身RNA的模板区为模板，在适宜的寡核苷酸链的末端添加6个碱基的重复序列，用聚丙烯酰胺 (PAGE)凝胶电泳可显示6个碱基差异的梯带。 1994年Kim建立了基于 PCR 基础上的端粒重复序列扩增法 (telomeric repeat amplification protocol, TRAP)。

内标准物可以作为模板用于检测端粒酶活性的同一对引物进行扩增吗？

该内标准物可以作为模板，用于检测端粒酶活性的同一对引物进行扩增。 内标准模板扩增片段长度为：50bp。 该内标准物的使用有两种方法： 第一种方法：将内标准物以一定量加入到端粒酶样品之中，用同一对引物在同一扩增管内进行竞争性扩增。 然后通过比较电泳图谱中内标准物和端粒酶扩增带的相对强度，即可达到相对定量的目的。

端粒酶是肿瘤标志物吗？

在胚性细胞等增殖活跃的细胞中具有端粒酶活性，而在正常成熟体细胞中端粒酶失活，同时还发现绝大多数肿瘤细胞都呈端粒酶阳性，而在癌旁组织和正常组织阳性率很低，推测端粒酶可能是一个广泛的肿瘤标志物 [1]。 因此近几年端粒酶在各种肿瘤中的研究日益深入，同时促进了检测方法的改进与完善。

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