细胞凋亡的检测方法有哪些?
细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。 根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。 1. 光学 显微镜 和倒置显微镜 (1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。 贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 (2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。 凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。 2. 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的 DNA 特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。
凋亡细胞的流式细胞计分析方法是什么?
凋亡细胞 DNA 含量的流式细胞计分析 方法 收集细胞→70% 冷乙醇(PBS 稀释)4 °C 固定过夜→PBS 洗涤,1 000 rpm × 10 min→RNase A(0.5 mg/ml)37 °C 消化 30 min→PI(50 mg/ml)染色,室温避光 15 min→FACScan 分析 DNA 亚二倍体的形成及细胞 ...
细胞凋亡的生化特征是什么?
细胞凋亡时主要的生化特征是其染色质发生浓缩, 染色质DNA在核小体单位之间的连接处断裂, 形成50~300kbp长的DNA大片段, 或180~200bp整数倍的寡核苷酸片段, 在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱 (DNA ladder)。 细胞经处理后,采用常规方法分离提纯DNA,进行 琼脂 糖凝胶和溴化乙啶染色,在凋亡细胞群中可观察到典型的DNA ladder。
凋亡细胞的调控机制是什么?
然而,凋亡细胞调节上述过程的机制目前仍不清楚。 作者的研究结果发现,凋亡代谢物分泌组(secretome)不是简单的被动排空细胞内容物,而是一个调控过程。 caspase介导的质膜PANX1通道开放,促进了细胞凋亡过程中持续释放有活力的代谢物。